Versión de HTML Básico
HEPARINA SÓDICA
Definición
- Heparina Sódica es la sal sódica de
un glucosaminoglicano sulfatado presente en los teji-
dos de mamíferos. Se obtiene a partir de pulmón del
ganado bovino o de la mucosa intestinal del ganado
bovino o porcino. Se produce de manera de minimi-
zar o eliminar la contaminación microbiana y las
sustancias hipotensoras. Por hidrólisis total, se libera
D
-glucosamina, ácido
D
-glucurónico, ácido
L
-
idurónico, ácido acético y ácido sulfúrico. Presenta la
propiedad característica de retrasar la coagulación de
la sangre recientemente extraída. La actividad de la
Heparina Sódica destinada a la administración paren-
teral no debe ser menor de 150 UI por miligramo,
calculada sobre la sustancia seca. La actividad de la
Heparina Sódica no destinada a la administración
parenteral no debe ser menor de 120 UI por miligra-
mo, calculada sobre la sustancia seca. Heparina Sódi-
ca debe cumplir con las siguientes especificaciones.
Caracteres generales
- Polvo blanco o casi blan-
co. Moderadamente higroscópico. Facilmente solu-
ble en agua.
Sustancias de referencia
- Heparina Bovi-
na SR-FA. Heparina Porcina SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases herméticos de cierre inviolable.
Precaución
- Los animales a partir de los cuales
la Heparina se obtiene deben cumplir los requeri-
mientos de animales sanos apropiados para el con-
sumo humano, con la autorización de la Autoridad
Sanitaria competente. El proceso de manufactura
deberá estar validado para demostrar la apropiada
inactivación o remoción de cualquier contaminación
por virus u otro agente infeccioso.
ENSAYOS
Identificación
A
- Debe retrasar la coagulación de sangre recien-
temente extraída.
B -
Examinar por electroforesis de zona (ver
300
.
Electroforesis
) empleando agarosa para electroforesis
como soporte [NOTA: también se puede emplear
como soporte para electroforesis tiras de acetato de
celulosa]. Para equilibrar la agarosa y como solución
electrolítica, emplear una mezcla de 50 ml de ácido
acético glacial y 800 ml de agua. Ajustar a pH 3 con
hidróxido de litio y diluir a 1 litro con agua.
Solución muestra
- Disolver 25 mg de Heparina
Sódica en agua y diluir a 10 ml con el mismo solven-
te.
Solución estándar
- Diluir la Heparina SR-FA co-
rrespondiente con agua para obtener una solución
similar a la
Solución muestra
.
Procedimiento
- Aplicar por separado sobre la ti-
ra entre 2 y 3 µl de
Solución estándar
y
Solución
muestra
. Aplicar una corriente eléctrica de 1 a 2 mA
por centímetro de ancho de tira, a una diferencia de
potencial de 300 V, durante aproximadamente
10 minutos. Teñir las tiras empleando una solución
de azul de toluidina al 0,1 % y lavar para eliminar el
exceso de colorante. La relación entre la movilidad
de la banda principal o de las bandas en el electrofo-
regrama obtenido a partir de la
Solución muestra
y la
movilidad de la banda en el electroforegrama obteni-
do con la
Solución estándar
debe ser de 0,9 a 1,1.
C -
El residuo obtenido en el ensayo de
Determi-
nación del residuo de ignición
debe responder a la
reacción de identificación para
Sodio
<410>.
Determinación de la rotación óptica
<170>
Rotación específica
: No menos de +35° determi-
nada a 20 °C sobre la sustancia seca.
Solución muestra
: 40 mg por ml, en agua.
Determinación del pH
<250>
Entre 5,5 y 8,0, determinado sobre una solución de
Heparina Sódica de aproximadamente 10 mg por ml
en agua libre de dióxido de carbono.
Impurezas proteicas y nucleotídicas
Disolver 40 mg de Heparina Sódica en agua,
transferir a un matraz aforado de 10 ml, completar a
volumen con el mismo solvente y mezclar. La absor-
bancia de esta solución (ver
470. Espectrofotometría
ultravioleta y visible
), determinada a 260 y 280 nm,
no debe ser mayor de 0,20 y 0,15, respectivamente.
Determinación de Nitrógeno
<200>
Método I.
No más de 2,5 %, con respecto a la sus-
tancia seca; determinado sobre 100 mg.
Sodio
Determinar por espectrofotometría de absorción
atómica (ver
Método I
en
440. Espectrofotometría de
absorción y emisión atómica
).
Solución madre del estándar
- Transferir una can-
tidad de cloruro de sodio que corresponda a 0,509 g
de cloruro de sodio a un matraz aforado de 100 ml,
disolver y completar a volumen con agua. Inmedia-
tamente antes de su empleo, transferir 1,0 ml de esta
solución a un matraz aforado de 10 ml, completar a
volumen con agua y mezclar. Esta solución debe
contener 200 ppm de sodio.
Soluciones estándar
- Preparar soluciones de
aproximadamente 25, 50 y 75 ppm de sodio, a partir
de
Solución madre del estándar
diluida con ácido
clorhídrico 0,1 M que contenga 1,27 mg de cloruro de