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Agregar un volumen de la dilución preparada
en
Recuento de microorganismos aerobios totales
equivalente a 1 g ó 1 ml de producto, a Caldo Dige-
rido de Caseína-Soja para obtener 100 ml o el vo-
lumen establecido en el ensayo de
Validez del
método de recuento
, mezclar e incubar a 30 - 35 °C
durante 18 a 24 horas.
Ensayo para Staphylococcus aureus
Subcultivar sobre una placa con Agar Manitol-
Salado. Incubar a 30 - 35 ºC durante 18 a 72 horas.
Si hay desarrollo de colonias típicas amarillas o
blancas rodeadas de una zona amarilla, identificar-
las para descartar
Staphylococcus aureus.
La muestra cumple con el ensayo para
Staphylo-
coccus aureus
si no se observa el desarrollo de
colonias con las características descriptas o si la
identificación es negativa.
Ensayo para Pseudomonas aeruginosa
Subcultivar sobre una placa con Agar Cetrimida.
Incubar a 30 - 35 °C durante 18 a 72 horas. Si hay
desarrollo de colonias generalmente verdosas iden-
tificarlas para descartar
Pseudomonas aeruginosa.
La muestra cumple con el ensayo para
Pseudo-
monas aeruginosa
si no se observa el desarrollo de
colonias con las características descriptas o si la
identificación es negativa.
Ensayo para Escherichia coli
Subcultivar sobre una placa con Agar Mac Con-
key. Incubar a 30 - 35 °C durante 18 a 72 horas. Si
hay desarrollo de colonias, identificarlas para des-
cartar
Escherichia coli
.
La muestra cumple con el ensayo para
Escheri-
chia coli
si no se observa el desarrollo de colonias
con las características descriptas o si la identifica-
ción es negativa.
Ensayo para
Salmonella
Transferir 0,1 ml de Caldo Digerido de Caseína-
Soja a 10 ml de Caldo Rappaport-Vassiliadis para
enriquecimiento de
Salmonella
e incubar a 30 –
35 °C durante un 18 a 24 horas. Subcultivar en
placas de Agar Xilosa Lisina Desoxicolato. Incubar
a 30 - 35 °C durante un período de 18 a 48 horas.
Si se observa la presencia de colonias bien des-
arrolladas color rojo, con o sin centro negro, identi-
ficarlas para descartar
Salmonella.
La muestra cumple con el ensayo para
Salmone-
lla
si no se observa el desarrollo de colonias con las
características descriptas o si la identificación es
negativa.
Ensayo para
Candida albicans
Agregar un volumen de la dilución preparada en
Recuento de microorganismos aerobios totales,
equivalente a 1g ó 1 ml de producto, a Caldo Sa-
bouraud Dextrosa para obtener 100 ml, o el volu-
men establecido en el ensayo de
Validez del método
de recuento
. Mezclar e incubar a 30 - 35 °C duran-
te 3 a 5 días. Subcultivar en una placa con Agar
Sabouraud Dextrosa e incubar a 30 - 35 ºC durante
24 a 48 horas.
Si se observa desarrollo de colonias blancas,
identificarlas para descartar
Candida albicans
.
La muestra cumple con el ensayo para
Candida
albicans
si no se observa el desarrollo de colonias
con las características descriptas o si la identifica-
ción es negativa.
Ensayo para anaerobios sulfito-reductores
Agregar un volumen de la dilución preparada en
Recuento de microorganismos aerobios totales,
equivalente a 1 g ó 1 ml de producto, a Medio Tio-
glicolato previamente calentado durante 10 minutos
en un baño de vapor y enfriado, adicionado de azida
sódica al 0,03 %, hasta obtener 100 ml. Cubrir la
superficie con una mezcla estéril de vaselina y para-
fina. [NOTA: la mezcla estéril de vaselina y parafi-
na se prepara fundiendo 250 g de parafina conjunta-
mente con 750 g de vaselina, mezclando bien, re-
partiendo en tubos y esterilizando en autoclave].
Incubar a 30 – 35 °C durante 48 a 72 horas. Si se
observa desarrollo microbiano, transferir 1 ml a un
tubo estéril de no más de 16 mm de diámetro exte-
rior y no menos de 200 mm de largo. Agregar por
las paredes Agar Sulfito-Polimixina-Sulfadiacina,
previamente fundido y enfriado a 40 ºC, hasta no
más de 1 cm del borde superior del tubo. Cubrir
con la mezcla de vaselina-parafina e incubar a
30-35 °C durante 5 a 7 días, observando diariamen-
te.
La muestra cumple con el ensayo de ausencia de
microorganismos anaerobios sulfito-reductores por
gramo o mililitro si no se observa el desarrollo de
colonias negras.
Ensayo para
Clostridios
Tomar dos porciones iguales correspondientes a
no menos de 1 g o 1 ml de producto a examinar.
Calentar una porción a 80 °C durante 10 minutos y
enfriar rápidamente. No calentar la otra porción.
Transferir 10 ml de cada una de las porciones
mezcladas a dos recipientes de 38 x 200 mm cada
uno u otros que contenga 100 ml de Medio Refor-
zado para Clostridios. Incubar bajo condiciones
anaeróbicas a 30 – 35 °C durante 48 horas. Después
de la incubación, realizar subcultivos a partir de
cada tubo en Agar Columbia e incubar en condicio-
nes anaeróbicas a 30 -35 °C durante 48 horas.