Versión de HTML Básico
Solución reguladora B
0
- A 30,0 ml de la
Solu-
ción reguladora madre
agregar 20,0 ml de agua.
Solución reguladora C
0
- A 15,0 ml de la
Solu-
ción reguladora madre
agregar 85,0 ml de agua.
Solución A
1
- Mezclar 3,0 ml de
Solución regu-
ladora A
0
y 12,0 ml de agua.
Solución B
1
- Mezclar 4,0 ml de
Solución regu-
ladora-B
0
y 11,0 ml de agua.
Solución C
1
- Mezclar 4,75 ml de
Solución re-
guladora C
0
y 10,25 ml de agua.
Procedimiento
- Transferir 1,4 ml de la
Solu-
ción S
2
a cada uno de tres tubos de centrífuga. Al
tubo I agregarle 0,1 ml de
Solución reguladora A
0
,
al tubo II agregarle 0,1 ml de
Solución reguladora
B
0
y al tubo III agregarle 0,1 ml de
Solución regu-
ladora C
0
. Agregar a cada tubo 0,02 ml de sangre
humana fresca heparinizada, mezclar bien y calen-
tar en un baño de agua a 30 ± 1 °C durante
40 minutos. Emplear sangre recolectada 3 horas
antes como máximo o sangre recolectada con solu-
ción anticoagulante de citrato-fosfato-dextrosa
24 horas antes como máximo.
A los tubos I, II y III agregar 1,5 ml de
Solución
A
1
,
Solución B
1
y
Solución C
1
, respectivamente. Al
mismo tiempo y de la misma manera, preparar otros
tres tubos, reemplazando
Solución S
2
por agua,
estos tubos servirán como control. Centrifugar
simultáneamente los tubos a ensayar y los de con-
trol a exactamente 2500 g en la misma centrífuga
horizontal durante 5 minutos. Determinar las ab-
sorbancias, con un espectrofotómetro apropiado, en
celdas de 1 cm, a la longitud de onda de 540 nm,
empleando la
Solución reguladora madre
como
blanco. Calcular el porcentaje de hemólisis por la
fórmula siguiente:
100
100
exp
A
A
en la cuál
A
100
, es la absorbancia del tubo III y
A
exp
son las absorbancias de los tubo I ó II, o las corres-
pondientes a los tubos controles.
La solución en el tubo I debe dar un porcentaje
de hemólisis no mayor a 10 % y el porcentaje de
hemólisis de la solución en el tubo II no debe diferir
en más de 10 % al del tubo control correspondiente.
Esterilidad
<370> - Introducir asépticamente
en el envase 100 ml de Solución fisiológica (SR)
estéril y agitar el envase para asegurar que la super-
ficie interna se moje completamente. Filtrar el
contenido del envase a través de un filtro de mem-
brana y colocar la membrana en un medio de culti-
vo apropiado. Los envases deben cumplir con el
ensayo de esterilidad.
Piretógenos
<340> - Inyectar 10 ml de la
Solu-
ción S
1
por cada kg de peso del conejo. La
Solución
S
1
debe cumplir con los requisitos establecidos.
Reactividad biológica
<380> - Realizar el en-
sayo según se indica en
380. Ensayo de reactividad
biológica in vitro.
Acondicionamiento
–
Los envases están contenidos en sobres protec-
tores. Al separarse el envase de su sobre protector,
el mismo no debe evidenciar fugas ni crecimiento
de microorganismos. El sobre protector debe ser
suficientemente resistente para soportar la manipu-
lación normal.
El sobre protector debe estar sellado de tal ma-
nera que no pueda abrirse y cerrarse nuevamente sin
evidenciar la rotura del mismo.
Rotulado
- Debe cumplir con las normas vi-
gentes.
Envases plásticos vacíos estériles de po-
li(cloruro de vinilo) plastificado para sangre
humana o hemoderivados
ENSAYOS
Deberán cumplir con los ensayos para
Envases
plásticos estériles para sangre humana o hemoderi-
vados
y con los siguientes ensayos para detectar
materia extraíble.
Solución de referencia -
Transferir
Agua para
Inyectables
a un erlenmeyer de vidrio al borosilica-
to y calentar en autoclave a 110 °C durante
30 minutos.
Sustancias reductoras
- Inmediatamente des-
pués de la preparación de la
Solución S
2
, transferir
al erlenmeyer al borosilicato una cantidad corres-
pondiente al 8 % de la capacidad nominal del enva-
se. Simultáneamente preparar un blanco empleando
un volumen igual de la
Solución de referencia
re-
cientemente preparada en otro erlenmeyer de vidrio
al borosilicato. A cada solución agregar 20,0 ml de
permanganato de potasio 0,002 M y 1 ml de ácido
sulfúrico diluido. Dejar reposar durante 15 minutos
protegido de la luz.
A cada solución agregar 0,1 g de ioduro de po-
tasio. Dejar reposar durante 5 minutos protegido de
la luz y titular inmediatamente con tiosulfato de
sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR)
como indicador. La diferencia entre las dos titula-
ciones no debe ser mayor de 2,0 ml.
Acidez o alcalinidad
- A un volumen de
Solu-
ción S
2
, equivalente al 4 % de la capacidad nominal
del envase, agregarle 0,1 ml de fenoftaleína (SR).
La solución permanece incolora. Agregar 0,4 ml de
una solución de hidróxido de sodio 0,01 M. La