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Residuo de pesticidas
(ver
630. Métodos de
farmacognosia
)
Debe cumplir con los requisitos.
VALORACIÓN
Determinación de glicósidos triterpénicos
Solución A
- Metanol y agua (65: 35).
Solución B
- Emplear la fase inferior de una
mezcla de 30 ml de ácido clorhídrico 0,1 N, 20 ml
de
n
-propanol y 50 ml de cloroformo.
Reactivo
- Disolver 75 mg de cloruro férrico en
50 ml de ácido acético glacial. Agregar 50 ml de
ácido sulfúrico mediante agitación. Dejar enfriar.
[NOTA: preparar inmediatamente antes de su uso].
Preparación estándar
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de escina en ácido acético
glacial, agitando durante 1 minuto. Hacer las dilu-
ciones necesarias hasta obtener soluciones de
aproximadamente 0,2; 0,4 y 0,6 mg de escina por
ml.
Preparación muestra
- Pesar exactamente alre-
dedor de 1,0 g de Semillas de Castaño de Indias
reducidas a polvo y colocar en un balón de 250 ml.
Agregar 100 ml de
Solución A
, pesar y llevar a
reflujo durante 30 minutos y dejar enfriar. Ajustar
al peso inicial mediante el agregado de
Solución A
,
si fuera necesario, mezclar y filtrar. Transferir
30,0 ml del filtrado a un balón y evaporar a seque-
dad a presión reducida. Disolver el residuo con
20 ml de ácido clorhídrico 0,1 N y transferir a una
ampolla de decantación de 250 ml, lavando con dos
porciones de 5 ml de ácido clorhídrico 0,1 N.
Agregar 20 ml de
n
-propanol y 50 ml de cloroformo
y agitar durante 2 minutos. Separar la fase clo-
rofórmica. Agregar
Solución B
a la fase superior
remanente en la ampolla. Agitar durante 2 minutos
y separar la fase clorofórmica. Combinar las fases
clorofórmicas en un balón y evaporar a sequedad.
Lavar el residuo con dos porciones de 10 ml de éter,
filtrar, lavar el filtro con 10 ml de éter y descartar
estos filtrados. Agregar al residuo una alícuota de
10 ml de ácido acético glacial y transferir a través
de un filtro previamente usado y secado, a un ma-
traz aforado de 50,0 ml. Repetir dos veces la adi-
ción de ácido acético glacial seguida por filtración y
combinar los filtrados en el matraz. Lavar el balón
con pequeñas cantidades de ácido acético glacial y
transferir a través del filtro al matraz. Completar a
volumen con ácido acético glacial.
Procedimiento
- Transferir 1,0 ml de cada una
de las diluciones de la
Preparación estándar
,
Pre-
paración muestra
y ácido acético glacial a tubos de
ensayo. Agregar 4,0 ml de
Reactivo
a cada tubo,
tapar los tubos, colocar en un baño de agua a 60 ºC
durante 25 minutos y agitar ocasionalmente. Medir
las absorbancias a 540 nm de la
Preparación mues-
tra
y de las diluciones de la
Preparación estándar
empleando el ácido acético glacial como blanco.
Graficar las absorbancias obtenidas de las dilucio-
nes de
Preparación estándar
versus las concentra-
ciones en mg por ml de escina en la correspondiente
dilución de la
Preparación estándar
. Del gráfico
así obtenido determinar la concentración
C
en mg
por ml de glicósidos triterpénicos como escina en la
Preparación muestra
. Calcular el porcentaje de
glicósidos triterpénicos en la porción de Castaño de
Indias en ensayo, por la fórmula siguiente:
50/3(
C
/
P
)
en la cual
C
es la concentración en mg por ml de
glicósidos triterpénicos en la
Preparación muestra
y
P
es el peso en g de Castaño de Indias en ensayo.