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Solución reguladora de fosfato de pH 3,1
-
Transferir 136,1 g de fosfato monobásico de potasio
a un matraz aforado de 1 litro. Disolver en 500 ml
de agua y agregar 6,3 ml de ácido fosfórico. Com-
pletar a volumen con agua y mezclar (pH 3,1± 0,1).
Fase móvil
- Agua, acetonitrilo,
Solución regu-
ladora de fosfato de pH 3,1
, ácido cítrico 1,0 M y
perclorato de sodio (51:35:10:2:2). Filtrar y desga-
sificar. Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud
del sistema
en
100. Cromatografía
).
Diluyente 1
- Acetonitrilo y metanol (1:1).
Diluyente 2
- Agua, acetonitrilo, fosfato dibási-
co de sodio 1,0 M, fosfato monobásico de potasio y
ácido cítrico 1,0 M (640:250:77:23:10).
Preparación estándar
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de Rifampicina SR-FA en
Diluyente 1
para obtener una solución de aproxima-
damente 1,5 mg por ml, sonicar, si fuera necesario,
para asegurar la disolución. Transferir 10 ml de
esta solución a un matraz aforado de 50 ml, comple-
tar a volumen con acetonitrilo y mezclar. [NOTA:
emplear esta solución dentro de las 5 horas de su
preparación.]
Preparación estándar
diluida
- Transferir 5,0 ml
de
Preparación estándar
a un matraz aforado de
50 ml, completar a volumen con
Diluyente 2
y
mezclar. La solución obtenida contiene aproxima-
damente 0,03 mg de Rifampicina SR-FA por ml.
[NOTA: Inyectar la
Preparación estándar diluida
en el cromatógrafo entre 30 y 60 segundos luego de
su preparación].
Preparación muestra
- Extraer el contenido de
no menos de veinte Cápsulas de Rifampicina y
mezclar. Pesar exactamente una cantidad equiva-
lente a 300 mg de rifampicina, transferir a un ma-
traz aforado de 200 ml y agregar aproximadamente
180 ml de
Diluyente 1.
Sonicar durante aproxima-
damente 5 minutos, dejar equilibrar a temperatura
ambiente, completar a volumen con
Diluyente 1
y
mezclar. Transferir 10,0 ml de esta solución a un
matraz aforado de 50 ml, completar a volumen con
acetonitrilo y mezclar. [NOTA: emplear esta solu-
ción dentro de las 5 horas de su preparación.]
Transferir 5,0 ml de esta solución a un matraz afo-
rado de 50 ml, completar a volumen con
Diluyen-
te 2
y mezclar. [NOTA: inyectar la
Preparación
muestra
en el cromatógrafo entre 30 y 60 segundos
luego de su preparación].
Solución de resolución
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de Quinona de Rifampici-
na SR-FA en
Diluyente 1
para obtener una solución
de aproximadamente 0,1 mg por ml. Transferir
1,5 ml de esta solución y 5,0 ml de
Preparación
estándar
a un matraz aforado de 50 ml, completar a
volumen con
Diluyente
y mezclar.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía) -
Cromatografiar la
Solución de resolución
y registrar
las respuestas de los picos según se indica en
Pro-
cedimiento
: los tiempos de retención relativos de-
ben ser aproximadamente 0,6 para quinona de ri-
fampicina y 1,0 para rifampicina; la resolución
R
entre los picos de quinona de rifampicina y rifampi-
cina no debe ser menor de 4,0. Cromatografiar la
Preparación estándar diluida
y registrar las res-
puestas de los picos según se indica en
Procedi-
miento
: la desviación estándar relativa para inyec-
ciones repetidas no debe ser mayor de 1,0%.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamen-
te 50 µl) de la
Preparación estándar
y la
Prepara-
ción muestra
, registrar los cromatogramas y medir
las respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C
43
H
58
N
4
O
12
en las Cápsulas de Rifam-
picina, de acuerdo a la cantidad declarada.