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Solución del estándar interno
- Transferir
2,0 ml de benzoato de metilo a un matraz aforado
de 100 ml, completar a volumen con metanol y
mezclar.
Preparación estándar
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de Clorhidrato de Tiami-
na SR-FA en
Fase móvil
para obtener una solución
de aproximadamente 1 mg por ml. Transferir
20,0 ml de esta solución a un matraz aforado de
50 ml, agregar 5,0 ml de
Solución del estándar
interno
, completar a volumen con
Fase móvil
y
mezclar para obtener una solución de aproximada-
mente 400 µg por ml.
Preparación muestra
- Pesar exactamente alre-
dedor de 200 mg de Clorhidrato de Tiamina, trans-
ferir a un matraz aforado de 100 ml, disolver, com-
pletar a volumen con
Fase móvil
y mezclar. Trans-
ferir 10,0 ml de esta solución a un matraz aforado
de 50 ml, agregar 5,0 ml de
Solución del estándar
interno
, completar a volumen con
Fase móvil
y
mezclar.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía
) -
Cromatografiar la
Preparación estándar
y registrar
las respuestas de los picos según se indica en
Pro-
cedimiento
: la resolución
R
entre los picos de tiami-
na y benzoato de metilo no debe ser menor de 4,0;
el factor de asimetría para el pico de tiamina no
debe ser mayor de 2,0; la eficiencia de la columna
determinada a partir del pico de tiamina no debe ser
menor de 1.500 platos teóricos; la desviación están-
dar relativa para inyecciones repetidas no debe ser
mayor de 2,0 %.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
10 µl) de la
Preparación estándar
y la
Preparación
muestra
, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C
12
H
17
ClN
4
OS . HCl en la porción de
Clorhidrato de Tiamina en ensayo.