Versión de HTML Básico
LEUCOVORINA CÁLCICA
N
N
N
N
H H
2
NH
O CHO
N
H
O
N
H
O
Ca
O
O
O
H
C
20
H
21
CaN
7
O
7
PM: 511,5
1492-18-8
Sinonimia -
Folinato Cálcico.
Definición -
Folinato Cálcico es
N
-[
p
-[[[(6
RS
)-
2-Amino-5-formil-5,6,7,8-tetrahidro-4-hidroxi-6-
pteridinil-]metil]amino]benzoil]-
L
-glutamato
de
calcio. Debe contener no menos de 95,0 por ciento
y no más de 105,0 por ciento de C
20
H
21
CaN
7
O
7
,
calculado sobre la sustancia anhidra y debe cumplir
con las siguientes especificaciones.
Caracteres generales
- Polvo amarillo o blan-
co amarillento. Muy soluble en agua; prácticamen-
te insoluble en alcohol.
Sustancia de referencia
- Folinato Cálci-
co SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos bien cerrados.
ENSAYOS
Identificación
A
- Absorción infrarroja <460>.
En fase sólida.
[NOTA: no secar la muestra].
B
- Examinar los cromatogramas obtenidos en
Valoración
. El tiempo de retención del pico princi-
pal en el cromatograma obtenido a partir de la
Pre-
paración muestra
se debe corresponder con el obte-
nido con la
Preparación estándar
.
Determinación de agua
<120>
Titulación volumétrica directa
. No más de
17,0 %.
Límite de metales pesados
<590>
Método II
. No más de 0,005 %.
VALORACIÓN
[NOTA 1: realizar este ensayo sin interrupcio-
nes, empleando agua recientemente desionizada
cada vez que se indique agua y material de vidrio
inactínico para todas las soluciones que contengan
Folinato Cálcico,].
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
30 cm 4,0 mm con fase estacionaria constituida
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 5 a 10
m de diámetro. El
caudal debe ser aproximadamente entre 1 y 2 ml
por minuto.
Solución de hidróxido de tetrabutilamonio
- Di-
solver una porción de hidróxido de tetrabutilamonio
en metanol para obtener una solución de aproxima-
damente 0,25 g por ml.
Solución de fosfato monobásico de sodio 2 N
-
Disolver una porción de fosfato monobásico de
sodio monohidrato en agua para obtener una solu-
ción de aproximadamente 276 mg por ml.
Fase móvil
- Mezclar 15 ml de
Solución de
hidróxido de tetrabutilamonio
con 835 ml de agua.
Agregar 125 ml de acetonitrilo y ajustar a un pH
aparente de 7,5 0,1 con
Solución de fosfato mo-
nobásico de sodio 2 N.
Mezclar, diluir a 1 litro con
agua y filtrar. Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud del sistema
en
100. Cromatografía
).
Diluyente
- Mezclar 15 ml de
Solución de
hidróxido de tetrabutilamonio
con 900 ml de agua y
ajustar a pH 7,5 0,1 con
Solución de fosfato mo-
nobásico de sodio 2 N.
Diluir a 1 litro con agua y
mezclar.
Preparación estándar
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de Folinato Cálcico SR-FA en
Diluyente
para obtener una solución de aproxima-
damente 175 µg de Folinato Cálcico anhidra por ml.
Preparación muestra
- Pesar exactamente alre-
dedor de 20 mg de Folinato Cálcico, transferir a un
matraz aforado de 100 ml, disolver, completar a
volumen con
Diluyente
y mezclar.
Solución de aptitud del sistema
- Disolver una
porción de
Ácido Fólico
en
Diluyente
para obtener
una solución de aproximadamente 175 µg por ml.
Mezclar 1 volumen de esta solución con
4 volúmenes de la
Preparación estándar.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía)
-
Cromatografiar la
Solución de aptitud del sistema
y
registrar las respuestas de los picos según se indica
en
Procedimiento
: la resolución
R
entre los picos de
Folinato Cálcico y ácido fólico no debe ser menor
de 3,6; los tiempos de retención relativos deben ser
aproximadamente 1,0 para Folinato Cálcico y 1,6
para ácido fólico; la desviación estándar relativa
para inyecciones repetidas no debe ser mayor de
2,0 %.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
15
l) de la
Preparación estándar
y la
Preparación
muestra
, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C
20
H
21
CaN
7
O
7
en la porción de Folinato
Cálcico en ensayo.