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alcanzar 200 °C, y se mantiene durante 6,5 minutos.
Se debe emplear hidrógeno como gas transportador
a una presión de 5 psig y el caudal debe ser aproxi-
madamente 320 ml por minuto.
Solución del estándar interno
- Transferir exac-
tamente alrededor de 1 ml de 2-pentanona a un
matraz aforado de 100 ml, completar a volumen con
una mezcla de metil sulfóxido y agua (1:1) y mez-
clar.
Solución estándar
- Transferir 10 ml de
Solu-
ción del estándar interno
a un matraz aforado de
100 ml. Agregar exactamente alrededor de 100
l
de alcohol absoluto, 100
l de acetato de isopropilo,
100
l de metanol, y 100
l de trietilamina. Com-
pletar a volumen con una mezcla de metilsulfóxido
y agua (1:1) y mezclar.
Solución muestra
- Pesar exactamente alrededor
de 5 g de Lamivudina, transferir a un matraz afora-
do de 100 ml, agregar 10 ml de
Solución del están-
dar interno
, completar a volumen con una mezcla
de metil sulfóxido y agua (1:1) y mezclar.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
0,5
l) de la
Solución estándar
y la
Solución mues-
tra
, registrar los cromatogramas y medir las res-
puestas de todos los picos. Calcular la cantidad en
porcentaje de cada solvente residual en la porción
de Lamivudina en ensayo, por la fórmula siguiente:
10(
C
/
P
)(
R
M
/
R
E
)
en la cual
C
es la concentración en mg por ml de
cada solvente en la
Solución estándar
;
P
es el peso
en g de Lamivudina en ensayo; y
R
M
y
R
E
son los
cocientes entre los picos de cada solvente y del
estándar interno obtenidos a partir de la
Solución
muestra
y la
Solución estándar
, respectivamente:
no debe contener más de: 0,2 % de alcohol, 0,2 %
de acetato de isopropilo, 0,1 % de metanol, 0,1 %
de trietilamina y 0,3 % del total del solvente resi-
dual.
Pureza cromatográfica
Fase estacionaria
,
Solución de acetato de amo-
nio 0,025 N
,
Fase móvil
,
Solución de aptitud del
sistema
y
Aptitud del sistema
- Proceder según se
indica en
Valoración.
Solución estándar
y
Solución muestra
- Proce-
der según se indica para
Preparación estándar
y
Preparación muestra
en
Valoración
, respectiva-
mente.
Solución de ácido salicílico
- Disolver una can-
tidad exactamente pesada de
Ácido Salicílico
en
Fase móvil
y diluir cuantitativamente, paso a paso
si fuera necesario, con
Fase móvil
para obtener una
solución de aproximadamente 0,625
g por ml.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
10
l) de
Solución de ácido salicílico
y
Solución
muestra
, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de todos los picos.
Calcular la cantidad en porcentaje de Ácido Sa-
licílico en la porción de Lamivudina en ensayo, por
la fórmula siguiente:
10
C
/
P
(
r
m
/
r
s
)
en la cual
C
es la concentración en
g por ml de
ácido salicílico en la
Solución de ácido salicílico
;
P
es el peso en mg de Lamivudina tomada en la
Solu-
ción muestra
,
r
m
y
r
s
son las respuestas de los picos
de ácido salícílico obtenidos a partir de la
Solución
muestra
y la
Solución de ácido salicílico
, respecti-
vamente.
Calcular el contenido en porcentaje de cualquier
otra impureza individual en la porción de Lamivu-
dina en ensayo, por la fórmula siguiente:
100(
r
i
/
r
t
)
en la cual
r
i
es la respuesta del pico de cualquier
otra impureza obtenida a partir de la
Solución mues-
tra
y
r
t
es la suma de todas las respuestas de los
picos: no debe contener más de: 0,5 % para cual-
quier pico con un tiempo de retención relativo de
aproximadamente 0,4; 0,3 % para cualquier pico
con un tiempo de retención relativo de aproxima-
damente 0,9; 0,2 % para ácido salicílico, 0,2 % para
cualquier otra impureza individual y 1,0 % de la
suma total de las impurezas.
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 277 nm y una columna de
25 cm 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 3 a 10
m de diámetro. Mante-
ner la temperatura de la columna a 35 ºC. El caudal
debe ser aproximadamente 1,0 ml por minuto.
Solución de acetato de amonio 0,025 N
- Trans-
ferir aproximadamente 1,9 g de acetato de amonio a
un matraz aforado de 1 litro, disolver en 900 ml de
agua, ajustar a pH 3,8 0,2, completar a volumen
con agua y mezclar.
Fase móvil
-
Solución de acetato de amonio
0,025 N
y metanol (95:5). Filtrar y desgasificar.
Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud del siste-
ma
en
100. Cromatografía).
Solución de aptitud del sistema
- Disolver el
contenido de un vial de Mezcla B de Resolución de
Lamivudina SR-FA en 2 ml de
Fase móvil
.
Preparación estándar
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de Lamivudina SR-FA y diluir