Versión de HTML Básico
ESTRADIOL
HO
H
H
CH
3
H
H OH
C
18
H
24
O
2
PM: 272,4
50-28-2
Definición
-
Estradiol es (17 )-Estra-
1,3,5(10)-trieno-3,17-diol. Debe contener no menos
de 97,0 por ciento y no más de 103,0 por ciento de
C
18
H
24
O
2
, calculado sobre la sustancia anhidra y
debe cumplir con las siguientes especificaciones.
Caracteres generales
- Polvo cristalino o cris-
tales pequeños blancos o casi blancos. Higroscópi-
co. Soluble en alcohol, acetona, dioxano, clorofor-
mo y soluciones de hidróxidos alcalinos; modera-
damente soluble en aceites vegetales; prácticamente
insoluble en agua.
Sustancias de referencia
- Estradiol SR-FA.
Estrona SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos de cierre perfecto.
ENSAYOS
Identificación
A
- Absorción infrarroja <460>.
En suspensión
.
B
- Absorción ultravioleta <470>
Solvente
: alcohol.
Concentración
: 50 µg por ml.
Las absortividades a 280 nm, calculadas sobre la
sustancia anhidra, no deben diferir en más de 3,0 %.
Determinación del punto de fusión
<260>
Método I.
Entre 173 y 179 ºC. [NOTA: secar
sobre sílica gel durante al menos 16 hs].
Determinación de la rotación óptica
<170>
Rotación específica
: Entre + 76 º y + 83 º.
Solución muestra
: 10 mg por ml, en dioxano.
Determinación de agua
<120>
Titulación volumétrica directa.
No más de
3,5 %.
Pureza cromatográfica
[NOTA: preparar las soluciones en el momento
de su uso].
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de
25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por partículas porosas de sílice de 3 a 10 µm de
diámetro. El caudal debe ser aproximadamente
2,0 ml por minuto.
Fase móvil
- 2,2,4-Trimetilpentano, cloruro de
n
-butilo y metanol (45:4:1). Filtrar y desgasificar.
Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud del sistema
en
100. Cromatografía
).
Diluyente
- Cloruro de
n
-butilo y metanol (5:1).
Solución muestra
- Pesar exactamente alrededor
de 70 mg de Estradiol, transferir a un matraz afora-
do de 10 ml, disolver en
Diluyente
, mezclar vigoro-
samente, completar a volumen con el mismo sol-
vente y mezclar.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía
) -
Cromatografiar la
Solución muestra
y registrar las
respuestas de los picos según se indica en
Procedi-
miento
: la resolución
R
entre los picos de estradiol y
de cualquier impureza no debe ser menor de 1,0; la
eficiencia de la columna no debe ser menor de
800 platos teóricos; el factor de asimetría no debe
ser mayor de 1,5; la desviación estándar relativa
para inyecciones repetidas no debe ser mayor de
2,0 %.
Procedimiento
- Inyectar en el cromatógrafo
aproximadamente 10 µl de la
Solución muestra
,
registrar el cromatograma y medir las respuestas de
todos los picos. Calcular el porcentaje de cada
impureza en la porción de Estradiol en ensayo,
relacionando la respuesta del pico de cada impureza
y la suma de las respuestas de todos los picos: no
debe contener más de 0,5 % de cualquier impureza
y no debe contener más de 1,0 % de impurezas
totales.
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 205 nm y una columna de
30 cm × 3,9 mm con fase estacionaria constituida
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 3 a 10 µm de diámetro. El
caudal debe ser aproximadamente 1,0 ml por minu-
to.
Fase móvil
- Acetonitrilo y agua (55:45). Fil-
trar y desgasificar. Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud del sistema
en
100. Cromatografía
).
Solución del estándar interno
- Transferir
aproximadamente 300 mg de
Etilparabeno
a un
matraz aforado de 500 ml, completar a volumen con
metanol y mezclar.
Preparación estándar
- Disolver cantidades
exactamente pesadas de Estradiol SR-FA y Estro-
na SR-FA en metanol para obtener una solución de
aproximadamente 0,40 mg y 0,24 mg por ml, res-
pectivamente. Transferir 10 ml de esta solución y