Versión de HTML Básico
b
2
,
b
3
,
b
4
y
b
5
que dan valores de
P
M
que no deben
diferir en más de un 5 % del valor declarado para
cada uno de los dextranos para calibrado, y de
180 ± 2 para la glucosa anhidra:
3
3
2
2
1 4
5
i
i
i
Kb KbKb b
i
e b M
y
1
1
(
) /
a
a
P
i
i
i
i
i
M y M y
en la cual
a
es el número de bandas en que se ha
dividido el cromatograma;
y
i
es la altura que separa
la línea de base del trazado del cromatograma en la
banda
i
;
M
i
es el peso molecular en la banda
i
.
Validación del sistema cromatográfico
Inyectar el volumen elegido de la
Solución de
validación del sistema
de Dextrano a analizar.
Peso molecular medio total del dextrano para
validación
- Calcular
P
M
según de indica en
Calibración del sistema cromatográfico
, empleando
los valores obtenidos para
b
1
,
b
2
,
b
3
,
b
4
y
b
5
.
El ensayo solo será válido si el valor de
P
M
es
de:
-
41.000 a 47.000 para el
Dextrano 40 para
validación SR-FA.
-
67.000 a 75.000 para el
Dextrano 60/70
para validación SR-FA.
Peso molecular medio de la fracción superior
de dextrano (10 %)
- Calcular
P
M
para la frac-
ción superior de dextrano (10 %) que eluye en la
banda
n
, por la fórmula siguiente:
P
M
=
n
i
i
n
i
i
i
y
My
1
1
(4)
estando
n
definido por las fórmulas siguientes:
!
n
i
a
i
i
i
y
y
1
1
1,0
(5)
y
"
a
i
i
n
i
i
y
y
1
1
1
1,0
(6)
el las cuales
a
es el número de bandas en que se ha
dividido el cromatograma;
y
i
es la altura que separa
la línea de base del trazado del cromatograma en la
banda
i
;
M
i
es el peso molecular en la banda
i
.
El ensayo solo será válido si el valor de
P
M
para la fracción superior de dextrano (10 %) es de:
-
110.000 a 130.000 para el
Dextrano 40
para validación SR-FA.
-
190.000 a 230.000 para el
Dextrano 60/70
para validación SR-FA.
Peso molecular medio de la fracción inferior de
dextrano (10 %)
-
Calcular
P
M
para la fracción
inferior de dextrano (10 %) que eluye en la banda
m
, por la fórmula siguiente:
(
) /
a
a
P
i
i
i
i m
i m
M y M y
(7)
estando
m
definido por las fórmulas siguientes:
!
a
i
i
a
mi
i
y
y
1
1,0
(8)
y
"
a
mi
a
i
i
i
y
y
1
1
1,0
(9)
el las cuales
a
es el número de bandas en que se ha
dividido el cromatograma;
y
i
es la altura que separa
la línea de base del trazado del cromatograma en la
banda
i
;
M
i
el peso molecular en la banda
i
.
El ensayo solo será válido si el valor de
P
M
para la fracción inferior de dextrano (10 %) es de:
-
6.000 a 8.500 para el
Dextrano 40 para
validación SR-FA.
-
7.000 a 11.000 para el
Dextrano 60/70
para validación SR-FA.
Distribución del peso molecular del dextrano
en ensayo
Inyectar el volumen elegido de la
Solución
muestra
. Calcular los valores de
P
M
que corres-
ponden respectivamente a la distribución del peso
molecular total, a la fracción superior de dextrano
(10 %) y a la fracción inferior de dextrano (10 %)
según se indica en
Validación del sistema croma-
tográfico
. El peso molecular promedio
P
M
debe
estar entre 64.000 y 76.000. El peso molecular
promedio de la fracción superior (10 %) debe ser
como máximo 185.000 y el de la fracción inferior
debe ser como mínimo 15.000.