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una porción de la fase acuosa y medir la absorban-
cia, en celdas de 1 cm, a la longitud de onda de
máxima absorción, aproximadamente 278 nm, con
un espectrofotómetro, empleando una solución
tratada del mismo modo que la muestra pero sin el
agregado de esta, como blanco. Calcular la canti-
dad de cloranfenicol libre en ppm por la fórmula
siguiente:
10
4
A
/5,96
en la cual
A
es la absorbancia de la solución en
ensayo: no debe contener más de 450 ppm.
Sustancias relacionadas
Fase estacionaria
- Emplear una placa para
cromatografía en capa delgada (ver
100. Cromato-
grafía
) recubierta con gel de sílice para cromato-
grafía con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm
de espesor.
Fase móvil
- Ciclohexano, cloroformo y meta-
nol (50:40:10).
Solución muestra
- Disolver 100 mg de Palmi-
tato de Cloranfenicol en acetona y diluir a 10 ml
con el mismo solvente.
Solución estándar A
- Disolver 20 mg del Isó-
mero de Palmitato de Cloranfenicol SR-FA en ace-
tona y diluir a 10 ml con el mismo solvente. Diluir
1 ml de esta solución a 10 ml con acetona.
Solución estándar B
- Disolver 20 mg de Di-
palmitato de Cloranfenicol SR-FA en acetona y
diluir a 10 ml con el mismo solvente. Diluir 1 ml
de esta solución a 10 ml con acetona.
Solución estándar C
- Disolver 5 mg de Cloran-
fenicol SR-FA en acetona y diluir a 10 ml con el
mismo solvente. Diluir 1 ml de esta solución a
10 ml con acetona.
Procedimiento -
Aplicar por separado sobre la
placa 10 µl de la
Solución muestra
y 10 µl de las
Soluciones estándar A
,
B
y
C.
Desarrollar los cro-
matogramas hasta que el frente del solvente haya
recorrido aproximadamente tres cuartas partes de la
longitud de la placa. Retirar la placa de la cámara,
marcar el frente del solvente, dejar secar al aire y
examinar bajo luz ultravioleta a 254 nm: en el cro-
matograma obtenido a partir de la
Solución mues-
tra
, ninguna mancha correspondiente al isómero de
palmitato de cloranfenicol y al dipalmitato de clo-
ranfenicol debe ser más intensa que la mancha
correspondiente en los cromatogramas obtenidos
con las
Soluciones estándar A
y
B
(2 %) y a excep-
ción de la mancha principal y las manchas corres-
pondientes al isomero de palmitato de cloranfenicol
y dipalmitato de cloranfenicol, ninguna otra mancha
debe ser más intensa que la mancha principal en el
cromatograma obtenido con la
Solución estándar C
(0,5 %).
Pérdida por secado
<680>
Secar hasta peso constante sobre pentóxido de
fósforo, al vacío, a una presión no mayor de
5 mm Hg: no debe perder más de 0,5 % de su peso.
VALORACIÓN
Disolver 90,0 mg de Palmitato de Cloranfenicol
en alcohol y diluir a 100 ml con el mismo solvente.
Diluir 10,0 ml de esta solución a 250 ml con alco-
hol y medir la absorbancia de esta solución, en
celdas de 1 cm, a la longitud de onda de máxima
absorción, aproximadamente 271 nm. Calcular la
cantidad de C
27
H
42
Cl
2
N
2
O
6
considerando el coefi-
ciente de extinción específica
E(1 %, 1 cm)
igual a
178.