Versión de HTML Básico
Tiempo
(minutos)
Fase móvil A
(%)
Fase móvil B
(%)
0 - 10
75
25
10 - 20
75 0
25 100
20 - 55
0
100
55 - 70
75
25
Fase móvil A
- Agua, metanol y solución de
fosfato monobásico de potasio al 3,4 % ajustada a
pH 3,5 con ácido fosfórico (60:30:10). Filtrar y
desgasificar. Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud del sistema
en
100. Cromatografía
).
Fase móvil B
- Metanol, agua y solución de fos-
fato monobásico de potasio al 3,4 % ajustada a pH
3,5 con ácido fosfórico (60:30:10). Filtrar y desga-
sificar. Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud
del sistema
en
100. Cromatografía
).
Solución muestra -
Emplear la
Preparación
muestra
preparada según se indica en
Valoración.
Solución estándar A
- Emplear la
Preparación
estándar
preparada según se indica en
Valoración.
Solución estándar B
- Diluir 1,0 ml de la
Solu-
ción estándar A
a 100 ml con
Fase móvil A.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20
l) de la
Solución muestra
y la
Solución están-
dar B
, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de todos los picos. La respuesta del pico
correspondiente a ácido bencilpenicilina benzatina
obtenido a partir de la
Solución muestra
no debe ser
mayor dos veces la suma de las respuestas de los
picos principales obtenidos con la
Solución están-
dar B
(2,0 %); y cualquier otra impureza obtenida a
partir de la
Solución muestra
no debe ser mayor que
la suma de las respuestas de los dos picos principa-
les obtenidos con la
Solución estándar B
(1,0 %).
Ignorar cualquier pico con una respuesta menor a
0,05 veces la suma de las respuestas de los dos
picos principales obtenidos con la
Solución están-
dar B
(0,05 %).
Ensayo de endotoxinas bacterianas
<330>
Cuando en el rótulo se indique que Bencilpeni-
cilina Benzatina es estéril no debe contener más de
0,01 Unidades de Endotoxina cada 100 Unidades de
Bencilpenicilina.
Ensayos de esterilidad
<370>
Cuando en el rótulo se indique que Bencilpeni-
cilina Benzatina es estéril, debe cumplir con los
requisitos según se indica en
Método de transferen-
cia directa
, excepto que se debe emplear
Caldo de
tioglicolato
y
Caldo digerido de caseína-soja
que
contenga solución de polisorbato 80 (1 en 200) y
una cantidad suficiente de penicilinasa estéril para
inactivar la Bencilpenicilina de cada tubo y agitar
los tubos una vez por día.
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 220 nm y una columna de
25 cm 4 mm con fase estacionaria constituida por
octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 5
m, totalmente recubierto.
Mantener la columna a 40 ºC. El caudal debe ser
aproximadamente 1,0 ml por minuto.
Fase móvil
- Agua, metanol y solución de fos-
fato monobásico de potasio al 6,8 % ajustada a pH
3,5 con ácido fosfórico (55:35:10). Filtrar y desga-
sificar. Hacer los ajustes necesarios (ver
Aptitud
del sistema
en
100. Cromatografía
).
Diluyente
- Preparar una solución que contenga
6,8 g de fosfato monobásico de potasio por litro y
1,02 g de fosfato dibásico de potasio por litro.
Preparación muestra
- Pesar exactamente alre-
dedor de 70 mg de Bencilpenicilina Benzatina,
transferir a un matraz aforado de 50 ml, disolver en
25 ml de metanol y completar a volumen con
Dilu-
yente.
Preparación estándar -
Pesar exactamente al-
rededor de 70 mg de Bencilpenicilina Benzati-
na SR-FA, transferir a un matraz aforado de 50 ml,
disolver en 25 ml de metanol y completar a volu-
men con
Diluyente.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía
) -
Cromatografiar la
Solución estándar A
y registrar
las respuestas de los picos según se indica en
Pro-
cedimiento
: el tiempo de retención relativo para
bencilpenicilina benzatina debe estar comprendido
entre 0,3 y 0,4 y para ácido bencilpenicilina benza-
tina debe ser aproximadamente 2,4.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20
l) de la
Preparación muestra
y la
Preparación
estándar
, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales.
Calcular el contenido en porcentaje de
C
16
H
20
ON
2
(benzatina) en la porción de Bencilpeni-
cilina Benzatina en ensayo.
Calcular el contenido en porcentaje de
C
48
H
56
N
6
O
8
S
2
en la porción de Bencilpenicilina
Benzatina en ensayo, multiplicando el contenido en
porcentaje de bencilpenicilina por 1,36.
ROTULADO
Cuando la Bencilpenicilina Benzatina esté des-
tinada a la preparación de formas farmacéuticas
inyectables, indicar en el rótulo que es estéril y libre
de endotoxinas bacterianas.