Versión de HTML Básico
RIBOFLAVINA,
5'-FOSFATO SÓDICO DE
2H
2
O
N
N
N
H
N
CH
3
H
3
C
O
P
O
ONa
OH
HO H
H OHH OH
O
O
C
17
H
20
N
4
NaO
9
P . 2H
2
O PM: 514,4
Anhidro PM: 478,3
130-40-5
Definición
- Riboflavina es 5'-(fosfato dihidró-
geno), sal monosódica, dihidrato. Debe contener no
menos de 73,0 por ciento y no más de 79,0 por
ciento de riboflavina (C
17
H
20
N
4
O
6
), calculado sobre
la sustancia seca y debe cumplir con las siguientes
especificaciones.
Caracteres generales -
Polvo fino cristalino de
color amarillo anaranjado. Higroscópico. Modera-
damente soluble en agua. Estable a la luz difusa
cuando está seco, pero en solución la luz induce
rápidamente su degradación.
Sustancias de referencia
- Riboflavina SR-FA.
5'-Fosfato Sódico de Riboflavina SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos de cierre perfecto.
ENSAYOS
Identificación
A
- Disolver 1 mg de 5'-Fosfato Sódico de Ri-
boflavina en 100 ml de agua: la solución es de color
amarillo verdoso pálido a la luz transmitida y pre-
senta fluorescencia verde amarillenta intensa bajo
luz ultravioleta de 375 nm que desaparece con el
agregado de ácidos o álcalis inorgánicos.
B
- A 0,5 g de 5'-Fosfato Sódico de Riboflavina
agregar 10 ml de ácido nítrico, evaporar la mezcla
en un baño de agua a sequedad, someter a ignición
el residuo hasta eliminar el residuo carbonoso,
disolver el residuo en 5 ml de agua, filtrar: el filtra-
do así obtenido responde a los ensayos para
Sodio
<410> y para
Fosfato
<410>.
Determinación de la rotación óptica
<170>
Rotación específica:
Entre +37,0° y +42,0°, de-
terminado dentro de los 15 minutos.
Solución muestra
: 15 mg por ml, en ácido
clorhídrico 5 N.
Determinación del pH
<250>
Entre 5,0 y 6,5, determinado sobre una solución
al 1 %.
Determinación del residuo de ignición
<270>
No más del 25,0 %.
Límite de fosfato libre
Solución de molibdato ácido
- Diluir 25 ml de
solución de molibdato de amonio 7 en 100 con agua
a 200 ml. Agregar lentamente a esta dilución 25 ml
de ácido sulfúrico 7,5 N y mezclar.
Solución de sulfato ferroso
- Preparar una solu-
ción 1 en 10 de sulfato ferroso en ácido sulfúrico
0,15 N. [NOTA: preparar esta solución en el mo-
mento de su uso].
Solución estándar
- Preparar una solución en
agua de aproximadamente 44,0 µg de fosfato mo-
nobásico de potasio por cada ml.
Solución muestra
- Transferir 300 mg de 5'-
Fosfato Sódico de Riboflavina a un matraz aforado
de 100 ml, disolver, completar a volumen con agua
y mezclar.
Procedimiento
- Transferir 10,0 ml de la Solu-
ción estándar
y 10,0 ml de la
Solución muestra
a
sendos erlenmeyers de 50 ml, agregar 10,0 ml de
Solución de molibdato ácido
y 5,0 ml de la
Solución
de sulfato ferroso
a cada erlenmeyer y mezclar.
Determinar en sucesión inmediata las absorbancias
de las soluciones, en celdas de 1 cm, a la longitud
de onda de máxima absorción, aproximadamente
700 nm, con un espectrofotómetro apropiado, em-
pleando una mezcla de 10,0 ml de agua, 10,0 ml de
Solución de molibdato ácido
y 5,0 ml de
Solución
de sulfato ferroso
como blanco: la absorbancia de la
solución obtenida a partir de la
Solución muestra
no
debe ser mayor que la absorbancia de la solución
obtenida a partir de la
Solución estándar
(1 %).
Sustancias relacionadas
[NOTA: realizar este ensayo de manera que to-
das las soluciones estén protegidas de la luz actíni-
ca, empleando preferentemente material de vidrio
inactínico.]
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 266 nm y una columna de
25 cm × 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 5 µm de diámetro. El caudal
debe ser aproximadamente 2,0 ml por minuto.
Fase móvil
- Preparar una mezcla de 850 ml de
fosfato monobásico de potasio 0,054 M con 150 ml
de metanol. Filtrar y desgasificar. Hacer los ajus-
tes necesarios (ver
Aptitud del sistema
en
100.
Cromatografía
).