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VALORACIÓN
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
30 cm × 4 mm con fase estacionaria constituida por
partículas porosas de sílice de 10 µm de diámetro
.
El caudal debe ser aproximadamente 1,0 ml por
minuto.
Fase móvil
- Cloruro de
n
-butilo, cloruro de
n
-butilo saturado con agua, tetrahidrofurano, meta-
nol y ácido acético glacial (475:475:70:35:30).
Filtrar y desgasificar. Hacer los ajustes necesarios
(ver
Aptitud del sistema
en
100. Cromatografía
).
Preparación estándar
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de Acetato de Hidrocortiso-
na SR-FA en
Fase móvil
y diluir cuantitativamente
y en etapas, si fuera necesario, con
Fase móvil
para
obtener una solución de aproximadamente 0,1 mg
por ml.
Preparación muestra
- Pesar exactamente alre-
dedor de 10 mg de Acetato de Hidrocortisona,
transferir a un matraz aforado de 100 ml, completar
a volumen con
Fase móvil
y mezclar.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía
) -
Cromatografiar la
Preparación estándar
y registrar
las respuestas de los picos según se indica en
Pro-
cedimiento
: el factor de asimetría para el pico de
acetato de hidrocortisona no debe ser mayor de 2,0;
la desviación estándar relativa para inyecciones
repetidas no debe ser mayor de 2,0 %.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
10 µl) de la
Preparación estándar
y la
Preparación
muestra
, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de los picos principales. Calcular la
cantidad de C
23
H
32
O
6
en la porción de Acetato de
Hidrocortisona en ensayo.