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FÓLICO, ÁCIDO
C
19
H
19
N
7
O
6
PM: 441,4
59-30-3
Definición
- Ácido Fólico es Ácido
N
-[4
-
[[(2-amino-1,4-dihidro-6-pteridinil)metil]amino]be
nzoil]-
L
-glutámico. Debe contener no menos de
97,0 por ciento y no más de 102,0 por ciento de
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, calculado sobre la sustancia anhidra y
debe cumplir con las siguientes especificaciones.
Caracteres generales
- Polvo cristalino amari-
llo, amarillo pardo o amarillo anaranjado, inodoro.
Soluble en ácido clorhídrico 3 N caliente, en ácido
sulfúrico 2 N caliente y en ácido clorhídrico da
soluciones de color amarillo pálido. Fácilmente
soluble en soluciones diluidas de hidróxidos y car-
bonatos alcalinos; muy poco soluble en agua; inso-
luble en acetona, alcohol, cloroformo y éter.
Sustancia de referencia
-
Ácido Fóli-
co SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos bien cerrados.
ENSAYOS
Identificación
A
- Absorción ultravioleta <470>
Solvente
: solución de hidróxido de sodio
1 en 250.
Concentración
: 10 µg por ml.
Relación de absorbancias
:
A
256
/
A
365
entre
2,80 y 3,00.
B
- Disolver 250 mg de Ácido Fólico en
hidróxido de sodio 0,1 N y diluir a 25 ml con el
mismo solvente. La rotación específica (ver
170.
Determinación de la rotación óptica
) debe ser
aproximadamente + 20°, calculada con respecto a la
sustancia anhidra.
Determinación de agua
<120>
Titulación volumétrica directa.
Agitar el meta-
nol antes, durante el agregado de la muestra y en la
determinación. No más de 8,5 %.
Determinación del residuo de ignición
<270>
No más de 0,3 %.
Pureza cromatográfica
[NOTA: emplear materiales de vidrio inactíni-
co].
Sistema cromatográfico, Solución de ácido
fosfórico 3 N
,
Solución de hidróxido de amonio 6 N
,
Fase móvil, Solución del estándar interno
,
Solución
madre del estándar
,
Preparación estándar
y
Apti-
tud del sistema
- Proceder según se indica en
Valo-
ración.
Solución muestra
- Emplear la
Solución madre
de la muestra
preparada según se indica en
Valora-
ción.
Procedimiento
- Inyectar en el cromatógrafo
aproximadamente 10 µl de la
Solución muestra.
Desarrollar los cromatogramas durante al menos
dos veces el tiempo de retención del ácido fólico.
Registrar los cromatogramas y medir las respuestas
de todos los picos. La suma de las respuestas de
todos los picos, excepto el correspondiente al ácido
fólico, no debe ser mayor de 2,0 %.
Impurezas orgánicas volátiles
<520>
Método II
.
VALORACIÓN
[NOTA: emplear materiales de vidrio inactíni-
co].
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de
25 cm × 4,0 mm con fase estacionaria constituida
por octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 3 a 10 µm de diámetro. El
caudal debe ser aproximadamente 1,2 ml por minu-
to.
Solución de ácido fosfórico 3 N
- Disolver 9,8 g
de ácido fosfórico en 100 ml de agua.
Solución de hidróxido de amonio 6 N
- Diluir
40 ml de hidróxido de amonio a 100 ml con agua.
Fase móvil
- Transferir 2,0 g de fosfato mono-
básico de potasio a un matraz aforado de 1 litro y
disolver en aproximadamente 650 ml de agua.
Agregar 15,0 ml de solución de hidróxido de tetra-
butilamonio 0,5 M en metanol, 7,0 ml de
Solución
de ácido fosfórico 3 N
y 270 ml de metanol. Enfriar
a temperatura ambiente y ajustar a pH 5,0 con
Solu-
ción de ácido fosfórico 3 N
o
Solución de hidróxido
de amonio 6 N
. Completar a volumen con agua,
mezclar y filtrar. [NOTA: controlar el pH antes de
usar.]
Solución del estándar interno
- Disolver
aproximadamente 50 mg de metilparabeno en
1,0 ml de metanol, diluir a 25,0 ml con
Fase móvil
y mezclar.
Solución madre del estándar
- Preparar una so-
lución de Ácido Fólico SR-FA en
Fase móvil
de
aproximadamente 1 mg por ml. [NOTA: para di-
solver el Ácido Fólico emplear 1 ml de hidróxido
de amonio al 10 % por cada 100 ml de la
Solución
madre del estándar.
]