Versión de HTML Básico
fisiológica (SR). Disolver completamente agitando
mecánicamente durante 30 minutos.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía
) -
Cromatografiar la
Solución estándar
y registrar las
respuestas de los picos según se indica en
Procedi-
miento
: la resolución
R
entre los picos correspon-
dientes a la solución fisiológica (SR) y al tricloroa-
minoplatinato no debe ser menor de 2,0; la desvia-
ción estándar relativa para inyecciones repetidas no
debe ser mayor de 3,0 %.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 µl) de la
Solución estándar
y la
Solución mues-
tra
, registrar los cromatogramas y medir las res-
puestas de los picos de tricloroaminoplatinato. Los
tiempos de retención relativos deben ser aproxima-
damente 1,0 para cisplatino (en el volumen muerto)
y 5,0 para tricloroaminoplatinato. Calcular el por-
centaje de tricloroaminoplatinato en la porción de
Cisplatino en ensayo, relacionando las respuestas de
los picos de tricloroaminoplatinato obtenidos a
partir de la
Solución muestra
y la
Solución están-
dar
, respectivamente. No debe contener más de
1,0 %.
Límite de transplatino
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatógrafía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 254 nm y una columna de
25 cm 4,6 mm con fase estacionaria constituida
por gel de sílice irregular de 10 µm de diámetro,
totalmente poroso, químicamente unida a un reves-
timiento de intercambio catiónico fuertemente áci-
do. Mantener la columna a 45 °C. El caudal debe
ser aproximadamente 2,0 ml por minuto. Acondi-
cionar la columna haciendo pasar
Fase móvil
con
un caudal de 2,0 ml por minuto durante 30 minutos,
luego a 0,5 ml por minuto durante 30 minutos y
luego nuevamente a 2,0 ml por minuto durante
30 minutos.
Fase móvil
- Preparar una solución de fosfato
monobásico de potasio 0,18 M. Ajustar con ácido
fosfórico a pH 3,2. Filtrar y desgasificar. Hacer los
ajustes necesarios (ver
Aptitud del sistema
en
100
.
Cromatografía
).
Solución madre del estándar
- Pesar exacta-
mente alrededor de 10 mg de Transplatino SR-FA,
transferir a un matraz aforado de 200 ml, completar
a volumen con solución fisiológica (SR) y agitar
mecánicamente durante 30 minutos para disolver.
Solución estándar de trabajo
- Transferir 5,0 ml
de
Solución madre del estándar
a un matraz aforado
de 25 ml que contenga aproximadamente 12 mg de
Cisplatino SR-FA. Completar a volumen con solu-
ción fisiológica (SR) y agitar mecánicamente duran-
te 30 minutos para disolver.
Solución estándar
- Transferir 10,0 ml de
Solu-
ción estándar de trabajo
a un matraz aforado de
50 ml. Agregar 5,0 ml de una solución de tiourea
1 en 200, recientemente preparada, y 5,0 ml de
ácido clorhídrico 1 N. Completar a volumen con
solución fisiológica (SR) y mezclar. Transferir
aproximadamente 10 ml de esta solución a un reci-
piente con tapa, revestida con politetrafluoroetileno
y calentar a 60,0 ± 0,5 °C durante 60 minutos.
Enfriar a temperatura ambiente.
Solución madre de la muestra
- Pesar exacta-
mente alrededor de 50 mg de Cisplatino, transferir a
un matraz aforado de 100 ml, completar a volumen
con solución fisiológica (SR) y agitar mecánica-
mente durante 30 minutos para disolver.
Solución muestra
- Transferir 10,0 ml de
Solu-
ción madre de la muestra
a un matraz aforado de
50 ml y proceder según se indica para
Solución
estándar,
comenzando donde dice
"Agregar 5,0 ml
de una solución de tiourea 1 en 200..."
.
Solución de resolución
- Transferir aproxima-
damente 10 mg de Cisplatino SR-FA a un matraz
aforado de 200 ml, completar a volumen con solu-
ción fisiológica (SR) y agitar mecánicamente duran-
te 30 minutos para disolver. Transferir 10,0 ml de
esta solución y 10,0 ml de
Solución madre del
estándar
a un matraz aforado de 50 ml. Proceder
según se indica para
Solución estándar
, comenzan-
do donde dice:
"Agregar 5,0 ml de una solución de
tiourea 1 en 200... "
.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía
) -
Cromatografiar la
Solución estándar
y registrar las
respuestas de los picos según se indica en
Procedi-
miento
: el tiempo de retención del transplatino
derivatizado debe ser entre 5,0 y 9,0 minutos (de no
ser así, hacer los ajustes necesarios en la
Fase móvil
y acondicionar la columna nuevamente). La efi-
ciencia de la columna no debe ser menor de 2.500
platos teóricos; la desviación estándar relativa para
inyecciones repetidas no debe ser mayor de 4,0 %.
Cromatografiar la
Solución de resolución
y registrar
las respuestas de los picos según se indica en
Pro-
cedimiento
: la resolución
R
no debe ser menor de
1,7.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
20 µl) de la
Solución muestra
y la
Solución están-
dar
, registrar los cromatogramas y medir las res-
puestas de los picos de transplatino. Los tiempos de
retención relativos deben ser aproximadamente 1,0
para cisplatino y 1,3 para transplatino. Calcular el
porcentaje de transplatino en la porción de Cisplati-
no en ensayo, relacionando las respuestas de los
picos de transplatino obtenidos a partir de la
Solu-
ción muestra
y la
Solución estándar
. No debe con-
tener más de 2,0 %.