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Fase estacionaria
- Emplear una placa para
cromatografía en capa delgada (ver
100. Cromato-
grafía
) recubierta con gel de sílice para cromato-
grafía con indicador de fluorescencia, de 0,25 mm
de espesor.
Fase móvil
- Cloruro de metileno, metanol,
hidróxido de amonio y acetonitrilo (4:4:2:1).
Solución estándar
- Transferir 5,0 mg de Impu-
reza A de Ciprofloxacino SR-FA a un matraz afora-
do de 50 ml que contenga 0,05 ml de hidróxido de
amonio 6 N, completar a volumen con agua y mez-
clar. Transferir 2,0 ml de esta solución a un matraz
aforado de 10,0 ml, completar a volumen con agua
y mezclar.
Solución muestra
- Disolver una cantidad de
Ciprofloxacino en ácido acético 0,1 N para obtener
una solución de aproximadamente 10,0 mg por ml.
Procedimiento
- Aplicar por separado sobre la
placa 5 µl de la
Solución muestra
y 5 µl de la
Solu-
ción estándar
. Dejar secar las aplicaciones y colo-
car la placa en una cámara apropiada en la cual se
ha colocado un vaso de precipitados conteniendo
50 ml de hidróxido de amonio. Luego de 15 minu-
tos, transferir la placa a una cámara y desarrollar los
cromatogramas hasta que el frente del solvente haya
recorrido aproximadamente tres cuartas partes de la
longitud de la placa. Retirar la placa de la cámara,
marcar el frente del solvente y dejar secar al aire
durante aproximadamente 15 minutos. Examinar la
placa bajo luz ultravioleta a 254 nm: cualquier
mancha en el cromatograma obtenido a partir de la
Solución muestra
, a un valor de
R
f
similar al de la
mancha principal en el cromatograma de la
Solu-
ción estándar
, no debe ser mayor en tamaño o in-
tensidad que la mancha principal obtenida con la
Solución estándar
(0,2 %).
Pureza cromatográfica
Sistema cromatográfico, Fase móvil, Prepara-
ción estándar
,
Solución de resolución
,
Preparación
muestra
y
Aptitud del sistema
- Proceder según se
indica en
Valoración.
Procedimiento -
Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
10 µl) de la
Preparación estándar
y la
Preparación
muestra
, registrar los cromatogramas y medir las
respuestas de todos los picos. Calcular el porcenta-
je de cada impureza en el cromatograma obtenido a
partir de la
Preparación muestra,
con respecto a la
suma de las respuestas de todos los picos. No debe
contener más de 0,2 % de Impureza B de Cipro-
floxacino o de cualquier otra impureza individual;
la suma de todas las impurezas no debe ser mayor
de 0,5 %.
Límite de metales pesados
<590>
Método II
. No más de 0,002 %.
Pérdida por secado
<680>
Secar al vacío a 120 °C durante 6 horas: no debe
perder más de 1,0 % de su peso.
Ensayo de endotoxinas bacterianas
<330>
Cuando en el rótulo se indique que Ciprofloxa-
cino es estéril, no debe contener más de 0,88 Uni-
dades de Endotoxina por mg de ciprofloxacino.
Ensayos de esterilidad
<370>
Cuando en el rótulo se indique que Ciprofloxa-
cino es estéril, debe cumplir con los requisitos
según se indica en
Método de filtración por mem-
brana.
VALORACIÓN
Sistema cromatográfico
- Emplear un equipo
para cromatografía de líquidos con un detector
ultravioleta ajustado a 278 nm y una columna de
25 cm × 4 mm con fase estacionaria constituida por
octadecilsilano químicamente unido a partículas
porosas de sílice de 3 a 10 µm de diámetro. Mante-
ner la temperatura de la columna a 30 ± 1 °C. El
caudal debe ser aproximadamente 1,5 ml por minu-
to.
Fase móvil
- Ácido fosfórico 0,025 M, previa-
mente ajustado a pH 3,0 ± 0,1 con trietilamina, y
acetonitrilo (87:13). Filtrar y desgasificar. Hacer
los ajustes necesarios (ver
Aptitud del sistema
en
100. Cromatografía
).
Preparación estándar
- Pesar exactamente al-
rededor de 25 mg de Ciprofloxacino SR-FA, trans-
ferir a un matraz aforado de 50 ml, agregar 0,2 ml
de ácido fosfórico al 7 %, completar a volumen con
Fase móvil
y mezclar.
Preparación muestra
- Pesar exactamente alre-
dedor de 25 mg de Ciprofloxacino, transferir a un
matraz aforado de 50 ml, agregar 0,2 ml de ácido
fosfórico al 7 %, completar a volumen con
Fase
móvil
y mezclar.
Solución de resolución
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de Impureza B de Ciprofloxa-
cino SR-FA en la
Preparación estándar
para obte-
ner una solución de aproximadamente 0,5 mg por
ml.
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía
) -
Cromatografiar la
Solución de resolución
y registrar
las respuestas según se indica en
Procedimiento
: los
tiempos de retención relativos deben ser aproxima-
damente 0,7 para impureza B de ciprofloxacino y
1,0 para ciprofloxacino; la resolución
R
entre los
picos de impureza B de ciprofloxacino y cipro-
floxacino no debe ser menor de 6. Cromatografiar
la
Preparación estándar
y registrar las respuestas
según se indica en
Procedimiento
: la eficiencia de
la columna determinada a partir del pico de cipro-