Versión de HTML Básico
CIANOCOBALAMINA
-
H
+
CN
CH
3
H
N O
O P O
OH
O
OH
O
O
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NH
2
O
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2
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3
CH
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Co
N N
N N
CH
3
CH
3
N
N
H
3
C
C
63
H
88
CoN
14
O
14
P PM: 1355,4
68-19-9
Sinonimia -
Vitamina B
12
.
Definición
- Cianocobalamina debe contener
no menos de 96,0 por ciento y no más de 100,5 por
ciento de C
63
H
88
CoN
14
O
14
P, calculado sobre la
sustancia seca y debe cumplir con las siguientes
especificaciones.
Caracteres generales
- Cristales de color rojo
oscuro o polvo cristalino o amorfo de color rojo.
La forma anhidra es muy higroscópica y expuesta al
aire puede absorber hasta un 12 % de agua. Soluble
en alcohol; moderadamente soluble en agua; inso-
luble en acetona, cloroformo y éter.
Sustancia de referencia
- Cianocobalami-
na SR-FA.
CONSERVACIÓN
En envases inactínicos de cierre perfecto.
ENSAYOS
Identificación
A
- Examinar el espectro de absorción obtenido
en
Valoración
. La
Solución muestra
debe presentar
máximos a 278 ± 1 nm y 361 ± 1 nm y a
550 ± 2 nm. La relación
A
361
/A
278
se debe encontrar
entre 1,70 y 1,90 y la relación
A
361
/A
550
debe estar
comprendida entre 3,15 y 3,40.
B
- Fundir aproximadamente 1 mg de Cianoco-
balamina con aproximadamente 50 mg de pirosulfa-
to de potasio en un crisol de porcelana. Enfriar,
deshacer la masa con una varilla de vidrio, agregar
3 ml de agua y disolver por calentamiento a ebulli-
ción. Agregar 1 gota de fenolftaleína (SR) y una
solución de hidróxido de sodio 1 en 10, gota a gota,
hasta color rosado incipiente. Agregar 500 mg de
acetato de sodio, 0,5 ml de ácido acético 1 N y
0,5 ml de solución de sal nitroso R (1 en 500): debe
aparecer inmediatamente un color rojo o rojo ana-
ranjado. Agregar 0,5 ml de ácido clorhídrico y
calentar a ebullición durante 1 minuto: el color rojo
no debe desaparecer.
C
- Disolver aproximadamente 5 mg de Ciano-
cobalamina en 5 ml de agua en un balón de destila-
ción de 50 ml conectado a un refrigerante corto.
Agregar al balón 2,5 ml de ácido hipofosforoso,
calentar a ebullición durante 10 minutos. Destilar
1 ml en un tubo de ensayo que contenga 1 ml de
solución de hidróxido de sodio 1 en 50. Agregar
4 gotas de solución saturada de sulfato ferroso
amónico en frío al destilado, agitar, agregar
aproximadamente 30 mg de fluoruro de sodio y
calentar el contenido a ebullición. Agregar de in-
mediato, gota a gota, ácido sulfúrico 5 N hasta que
la solución se torne transparente, luego agregar 3 a
5 gotas más del ácido: debe desarrollar color azul o
verde azulado.
Pérdida por secado
<680>
Pesar exactamente alrededor de 25 mg de Cia-
nocobalamina, secar al vacío 105 °C y a una pre-
sión de no más de 5 mm Hg durante 2 horas, enfriar
y pesar: no debe perder más de 12,0 % de su peso.
Pseudo cianocobalamina
Disolver 1,0 mg de Cianocobalamina en 20 ml
de agua dentro de una ampolla de decantación,
agregar 5 ml de una mezcla de tetracloruro de car-
bono y cresol (50:50) y agitar durante aproximada-
mente 1 minuto. Dejar separar, transferir la fases
inferior a una segunda ampolla de decantación,
agregar 5 ml de ácido sulfúrico 5 N, agitar y dejar
separar las fases, centrifugando si fuera necesario:
la fase superior debe ser incolora o presentar una
coloración no más intensa que una mezcla de
0,15 ml de permanganato de potasio 0,10 N y
250 ml de agua.
VALORACIÓN
Preparación estándar
- Disolver una cantidad
exactamente pesada de Cianocobalamina SR-FA en
agua y diluir cuantitativamente y en etapas con agua
para obtener una solución de aproximadamente
30 µg por ml.
Preparación muestra
- Pesar exactamente alre-
dedor de 30 mg de Cianocobalamina, transferir, con
la ayuda de agua, a un matraz aforado de 1 litro,
completar a volumen con agua y mezclar.
Procedimiento
- Determinar concomitantemen-
te las absorbancias de ambas soluciones en celdas
de 1 cm a la longitud de onda de máxima absorción,
aproximadamente 361 nm, con un espectrofotóme-
tro apropiado, empleando agua como blanco. Cal-