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510. IMPUREZAS COMUNES
El perfil de impurezas de un producto se
determina mediante la realización de este ensayo.
La información general necesaria sobre
cromatografía en placa delgada esta contenida en
<
100>. Cromatografía
.
A menos que se
especifique de otro modo en la monografía
correspondiente emplear el siguiente ensayo.
Fase estacionaria
- Emplear una placa para
cromatografía en capa delgada (ver
100.
Cromalografía
) recubierta con gel de sílice para
cromatografía con indicador de fluorescencia de
0,25 mm de espesor.
Fase móvil
-
Emplear la fase móvil
especificada en la monografía correspondiente.
Soluciones estándar
- Preparar, empleando el
solvente especificado en la monografía
correspondiente, soluciones de la
Sustancia de
referencia
o de la sustancia indicada, de
concentraciones exactamente conocidas, iguales a
0,01; 0,05; 0,1 y 0,2 mg por ml. [NOTA: puede
emplearse calentamiento o sonicación para
favorecer la disolución cuando esto no afecte a la
Sustancia de referencia
.]
Solución muestra
- Preparar, empleando el
solvente especificado en la monografía
correspondiente, una solución que contenga una
concentración final de aproximadamente 10 mg
por ml. [NOTA: se puede emplear calentamiento
o sonicación para favorecer la disolución cuando
esto no afecte a los componentes de la muestra.]
Procedimiento
- Aplicar por separado sobre la
placa volúmenes iguales (aproximadamente 20 µl)
de la
Solución muestra
y las
Soluciones estándar
.
Secar las aplicaciones bajo una corriente de
nitrógeno y desarrollar los cromatogramas hasta
que el frente del solvente haya recorrido
aproximadamente tres cuartos de la longitud de la
placa. Retirar la placa de la cámara, marcar el
frente del solvente y dejar secar al aire. Examinar
la placa empleando el
Revelador
especificado.
Localizar las manchas, con excepción de la
mancha principal en el cromatograma de la
Solución muestra
, y determinar sus intensidades
relativas comparando con los cromatogramas de
las
Soluciones estándar
correspondientes. El total
de impurezas comunes no debe ser mayor de
2,0 %, a menos que se especifique de otro modo
en la monografía correspondiente.
Reveladores
-
1. Luz ultravioleta de 254 y 366 nm.
2. Iodoplatinato (SR).
3. Solución A - Mezclar 850 mg de subnitrato
de bismutocon 40 ml de agua y 10 ml de ácido
acético glacial.
Solución B - Disolver 8 g de ioduro de
potasio en 20 ml de agua.
Mezclar la Solución A y la Solución B para
obtener una solución que pueda ser almacenada
durante varios meses en envases de vidrio
inactínico. Mezclar 10 ml de esta solución con
20 ml de ácido acétco glacial y diluir con agua
para obtener 100 ml.
4. Solución de ninhidrina para pulverizado -
Disolver 200 mg de ninhidrina en 100 ml de
alcohol. Calentar la placa luego de pulverizar
sobre ésta.
5. Solución ácida para pulverizado - A 90 ml
de alcohol, en un baño de hielo, agregar
lentamente
y
con
cuidado,
agitando
constantemente, 10 ml de ácido sulfúrico.
Pulverizar sobre la placa y calentar hasta
carbonizar.
6. Solución de dicromato ácido para
pulverizado - A 100 ml de ácido sulfúrico,
agregar dicromato de potasio, en cantidad
suficiente, para obtener una solución saturada.
Pulverizar sobre la placa y calentar hasta
carbonizar.
7. Vainillina - Disolver 1 g de vainillina en
100 ml de ácido sulfúrico.
8. Cloramina T-Acido tricloroacético -
Mezclar 10 ml de una solución acuosa de
cloramina T al 3 % con 40 ml de una solución
alcohólica de ácido tricloroacético al 25 %.
Preparar inmediatamente antes de usar.
9. Folin C - A 70 ml de agua agregar 10 g de
tungstato de sodio y 2,5 g de molibdato de sodio.
Agregar 5 ml de ácido fosfórico al 85 % y 10 ml
de ácido clorhídrico al 36 %, calentar a reflujo
esta solución durante 10 horas.
10. Permanganato de potasio (KMnO
4
11. DAB -
Mezclar 1 g de p-
dimetilaminobenzaldehído en 100 ml de ácido
clorhídrico 0,6 N.
) -
Disolver 100 mg de permanganato de potasio en
100 ml de agua.
12. DAC -
Mezclar 100 mg de p-
dimetilaminocinamaldehído en 100 ml de ácido
clorhídrico 1 N.
13. Ferricianuro - Mezclar cloruro férrico al
1 % y ferricianuro de potasio al 1 % (50:50).
Emplear inmediatamente.
14. Fast Blue B -