Versión de HTML Básico
hasta 240 °C y mantener a esta temperatura durante
5 minutos. Se emplea helio como gas transportador
con una velocidad lineal de aproximadamente
50 cm por segundo.
Solución estándar
- Preparar una mezcla de
ésteres de composición conocida que contenga los
ésteres que se especifiquen en la monografía
correspondiente. Esta solución puede contener
otros componentes. [NOTA: en el comercio existen
mezclas de ésteres que pueden emplearse para este
propósito.]
Solución muestra
- Transferir aproximadamente
100 mg de muestra, exactamente pesados, a un
erlenmeyer de 50 ml. [NOTA: si la muestra
contiene ácidos grasos con más de dos dobles
enlaces, purgar el erlenmeyer con nitrógeno.]
Adosar un refrigerante y una barra de agitación
magnética, agregar 4 ml de solución de hidróxido
de sodio 0,5 N en metanol y calentar a reflujo entre
5 y 10 minutos, hasta que desaparezcan los glóbulos
de aceite. Agregar 5 ml de una solución preparada
disolviendo 14 g de trifluoruro de boro en 100 ml
de metanol. Agitar por rotación para mezclar y
calentar a reflujo durante 2 minutos. Agregar 4 ml
de
n
-heptano a través del refrigerante y calentar a
reflujo durante 1 minuto.
Enfriar, retirar el
refrigerante, agregar aproximadamente 15 ml de
solución saturada de cloruro de sodio, agitar y dejar
que las fases se separen. Filtrar la fase de
n
-heptano a través de 0,1 g de sulfato de sodio
anhidro (previamente lavado con
n
-heptano).
Transferir 1,0 ml del filtrado a un matraz aforado de
10 ml, diluir a volumen con
n
-heptano y mezclar.
Solución de aptitud del sistema
- Transferir
aproximadamente 20 mg de ácido esteárico, 20 mg
de ácido palmítico y 20 mg de ácido oleico,
exactamente pesados, a un erlenmeyer de 25 ml
adaptado a un refrigerante y con una barra de
agitación magnética. Proceder según se indica para
la
Solución muestra
, comenzando donde dice
"Agregar 5 ml de una solución preparada
disolviendo...".
Aptitud del sistema
(ver
100. Cromatografía
) -
Cromatografiar la
Solución de aptitud del sistema
,
registrar los cromatogramas y medir las respuestas
de los picos según se indica en
Procedimiento
: la
resolución,
R
, entre los picos de estearato de metilo
y oleato de metilo no es menor de 1,5; los tiempos
de retención relativos son aproximadamente 0,87
para palmitato de metilo, 0,99 para estearato de
metilo y 1,0 para el oleato de metilo; la desviación
estándar relativa de las respuestas de los picos de
palmitato de metilo y estearato de metilo para
inyecciones repetidas no es mayor de 6,0 % y la
desviación estándar relativa del cociente entre las
respuestas de los picos del palmitato y el estearato
para inyecciones repetidas no es mayor de 1,0 %.
Procedimiento
- Inyectar por separado en el
cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente
1 µl) de la
Solución estándar
y la
Solución muestra
,
registrar los cromatogramas y medir las respuestas
de todos los picos de los ésteres de los ácidos
grasos. Comparar los tiempos de retención de los
picos de los ésteres de los ácidos grasos en el
cromatograma de la
Solución muestra
con los
obtenidos en el cromatograma de la
Solución
estándar
. Calcular el porcentaje de cada ácido
graso presente en la muestra, por la fórmula
siguiente:
BA
/
100
en la cual
A
es la respuesta del pico obtenido para
cada éster de ácido graso individual y
B
es la suma
de las respuestas de todos los picos, excluyendo el
pico del solvente, en el cromatograma obtenido a
partir de la
Solución muestra
.
Agua y sedimento en aceites fijos
Aparato
- Emplear una centrífuga con un
diámetro de giro (d = distancia entre los extremos
de los tubos cuando están girando) de 38 a 43 cm y
emplearla a una velocidad de aproximadamente
1500 rpm.
Si se emplea una centrífuga de
diferentes dimensiones, calcular la velocidad
requerida, por la fórmula siguiente:
d
rpm V
/6,40 500 .1
Emplear tubos de centrífuga cónicos graduados
y con tapones. La capacidad total de cada tubo
debe ser de aproximadamente 125 ml.
Las
graduaciones deben ser claras y diferenciadas,
empezando desde el fondo del tubo hacia arriba
según la escala que se indica en la
Tabla 3
.
Procedimiento
- Transferir 50,0 ml de benceno
a dos tubos de centrífuga y, a cada tubo, agregar
una porción de 50,0 ml del aceite previamente
calentado a 25 °C y agitado, si fuera necesario, para
incorporar nuevamente la estearina separada. Tapar
perfectamente los tubos, agitarlos vigorosamente
hasta que el contenido se mezcle completamente y
luego sumergirlos en un baño de agua a 50 °C
durante 10 minutos.
Centrifugar durante
10 minutos. Leer el volumen combinado de agua y
sedimento en el fondo de cada tubo. Centrifugar
nuevamente durante períodos de 10 minutos hasta
que el volumen combinado de agua y sedimento
permanezca constante en tres lecturas sucesivas. La
suma de los volúmenes de agua y sedimento
combinado en los dos tubos representa el