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FACTOR VIII DE
COAGULACION HUMANO
Definición
- El Factor VIII de Coagulación
Humano es una fracción de proteínas plasmáticas
que contiene fractor VIII (glicoproteína de la
coagulación), junto con cantidades variables de
factor de von Willebrand, dependiendo del método
de preparación. Se obtiene a partir de plasma que
debe cumplir los requisitos en
Plasma Humano
para Fraccionamiento
. La potencia de la
preparación, reconstituida según se indica en el
rótulo, debe no ser menor a 20 UI de factor VIII:C
por mililitro.
Caracteres generales
- Polvo higroscópico o
masa sólida friable, blanca o amarillo pálido.
PRODUCCIÓN
El método de preparación debe incluir uno o
varios pasos que hayan demostrado eliminar o
inactivar agentes infecciosos conocidos. Si se
utilizan sustancias para inactivación de virus
durante la producción, deberá validarse el
procedimiento posterior de purificación para
demostrar que la concentración de estas sustancias
se reduce a niveles apropiados y que cualquier
residuo presente no compromete la inocuidad de la
preparación para los pacientes.
La actividad específica antes del agregado de
cualquier proteína estabilizante, no debe ser menor
a 1 UI de factor VIII:C por miligramo de proteína
total.
La fracción de factor VIII se disuelve en un
líquido apropiado. Pueden agregarse sustancias
auxiliares tales como estabilizadores. No se deben
agregar conservantes antimicrobianos. La solución
se filtra a través de una membrana capaz de retener
bacterias, se distribuye asépticamente en el envase
final y se congela inmediatamente. Posteriormente
se liofiliza y los envases se cierran con vacío o bajo
atmósfera de gas inerte.
Ensayo de validación aplicable a productos
que contienen actividad de factor von
Willebrand
Para productos indicados para el tratamiento de
enfermedad de von Willebrand deberá demostrarse
que el proceso de fabricación produce un producto
con una composición consistente con respecto al
factor de von Willebrand. Esta composición puede
ser caracterizada de varias formas. Por ejemplo,
puede determinarse el número y la cantidad relativa
de los diferentes multímeros por electroforesis en
gel de agarosa (1 % de agarosa) con dodecil sulfato
de sodio (SDS) con o sin análisis por Western blot
sobre nitrocelulosa, utilizando una mezcla de
plasma humano normal como referencia; la
visualización del patrón multimérico puede
realizarse por una técnica inmunoenzimática y la
evaluación cuantitativa puede realizarse por análisis
densitométrico u otro método adecuado.
Ensayo de validación aplicable a productos
que presentan partículas en suspensión al ser
reconstituidos
Si después de la reconstitución del liofilizado,
aparecen partículas, se debe demostrar que la
potencia no se ve significativamente afectada
después del pasaje de la preparación a través de los
filtros que se encuentran en el material para la
administración provisto junto con el producto.
CONSERVACIÓN
En envases herméticos protegido de la luz.
[NOTA: reconstituir la preparación según se
indica en el rótulo inmediatamente antes de realizar
los
Ensayos
,
excepto
Solubilidad
y
Agua
, y la
Valoración
.]
ENSAYOS
Identificación
Debe cumplir con los requisitos según se indica
en
Valoración de factor VIII
y, cuando corresponda
en
Valoración de factor de von Willebrand.
Solubilidad
Al contenido de un envase, agregar el volumen
de solvente indicado en el rótulo a la temperatura
recomendada. La preparación debe disolverse
completamente en no más de 10 minutos con
agitación suave formando una solución límpida o
ligeramente opalescente, incolora o ligeramente
amarillenta. Si en el rótulo se indica que pueden
aparecer partículas en suspensión luego de la
reconstitución, la solución debe filtrarse con el
material provisto y la solución filtrada deberá ser
clara, límpida o ligeramente opalescente
Determinación del pH
<250>
Entre 6,5 y 7,5.
Osmolalidad
<640>
No debe ser menor de 240 mosmol/kg.
Proteínas totales
Diluir la preparación a examinar, si fuera
necesario, con una solución de cloruro de sodio
9 g por litro para obtener una solución de
aproximadamente 15 mg de proteína en 2 ml.
Transferir 2,0 ml a un tubo de centrífuga de fondo
redondo y agregar 2,0 ml de una solución de
molibdato de sodio
75 g por litro
y 2,0 ml de una