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Tabla 1 - continuación
. Preparación del gel de resolución.
Componentes de la
solución de acrilamida
Volumen de cada componente por volumen de gel de moldeado
(ml)
5
10
15
20
25
30
40
50
14 %
Agua
1,4
2,7
3,9
5,3
6,6
8,0
10,6
13,8
Solución de
acrilamida
2,3
(1)
4,6
7,0
9,3
11,6
13,9
18,6
23,2
Tris pH 8,8 (1,5 M)
1,2
(2)
2,5
3,6
5,0
6,3
7,5
10,0
12,5
SDS 10 %
0,05
(3)
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,4
0,5
PSA 10 %
0,05
(4)-
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,4
0,5
TEMED
0,002
(5)
0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
15 %
Agua
1,1
2,3
3,4
4,6
5,7
6,9
9,2
11,5
Solución de
acrilamida
2,5
(1)
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0
20,0
25,0
Tris pH 8,8 (1,5 M)
1,3
(2)
2,5
3,8
5,0
6,3
7,5
10,0
12,5
SDS 10 %
0,05
(3)
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,4
0,5
PSA 10 %
0,05
(4)-
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,4
0,5
TEMED
0,002
(5)
0,004 0,006 0,008 0,01 0,012 0,016 0,02
Tabla 2
. Preparación del gel de apilamiento.
Componentes de la
solución
Volumen de cada componente por volumen de gel de moldeado
(ml)
1
2
3
4
5
6
8
10
Agua
0,68
1,4
2,1
2,7
3,4
4,1
5,5
6,8
Solución de
acrilamida
0,17
(1)
0,33
0,5
0,67
0,83
1,00
1,3
1,7
Tris pH 6,8 (1,0 M)
0,13
(2)
0,25
0,38
0,5
0,63
0,75
1,0
1,25
SDS 10 %
0,01
(3)
0,02
0,03
0,04
0,05
0,06
0,08
0,1
PSA 10 %
0,01
(4)-
0,02
0,03
0,04
0,05
0,06
0,08
0,1
TEMED
0,001
(5)
0,002 0,003 0,004 0,005 0,006 0,008
0,01
1 - Solución de acrilamida: solución de acrilamida/bisacrilamida (29:1) al 30 % - Preparar una solución que
contenga 290 g de archilamida y 10 g de metilenbisacrilamida por litro de agua.
2 - Tris pH 8,8 (1,5 M): solución reguladora tris – clorhídrico de pH 8,8 con ácido clorhídrico (1,5 M) -
Disolver 90,8 g de tris(hidroximetil)aminoetano en 400 ml de agua. Ajustar a pH 8,8 con ácido clorhídrico y
completar a 500 ml con agua.
3 - SDS 10 %: solución de laurilsulfato de sodio al 10 %.